方艙實(shí)驗(yàn)室PCR儀設(shè)置步驟

1、將二區(qū)準(zhǔn)備的PCR八連管按順序放入PCR儀里

2、PCR內(nèi)設(shè)置好程序運(yùn)行機(jī)器。

步驟1    逆轉(zhuǎn)錄(循環(huán)1)    55℃    15 min

步驟2    預(yù)變性(循環(huán) 1)    95℃    30 sec

步驟3    循環(huán)反應(yīng)(循環(huán)45)    95℃    10 sec

             57℃(采集熒光)    30 sec

說明:

(1 )檢測(cè)熒光選擇: ORF1ab基因(FAM)，N基因(ROX)，內(nèi)參基因(VIC)。

2)ABI7500熒光定量PCR儀不選ROX校正，淬滅基團(tuán)選None.

4.結(jié)果分析 參數(shù)設(shè)定

根據(jù)分析后擴(kuò)增曲線圖調(diào)節(jié)起始值，(建議起始設(shè)在3~15、 終止設(shè)在5~20，同

時(shí)調(diào)整陰性對(duì)照的擴(kuò)增曲線平直或低于閾值線)，點(diǎn)擊分析，在報(bào)告界面查看

結(jié)果。